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        鸡大肠杆菌病是指由致病性大肠埃希菌(Es-herichia coli)引起的急性或慢性的细菌性传染
    病。随着养鸡业的迅速发展和高度集约化发展,鸡大肠杆菌病已成为鸡细菌性疾病的常见多发病。据相关资料显示,鸡大肠杆菌病的发病率占鸡细菌性疾病的33 ,且药物的疗效明显降低。另外,由于鸡大肠杆菌的血清型众多,致使致病性和耐药性较复杂,兽医I临床常用的抗菌药物对鸡大肠杆菌病的防治效果不佳,甚至无效。产超广谱B一内酰胺酶(Extended Spectrum —lactamases,ESBLs)是细菌对G一内酰胺类抗生素耐药最重要的机制[4]。近年【维普】来,由于抗菌药物在兽医临床上的广泛应用,细菌产生了能够水解此类抗生素的ESBLs,这种酶对药物有水解作用,使其失去 了抗菌活性,占多数的敏感菌株不断被杀灭,耐药菌株代替了敏感菌株,致使细菌对药物的耐药率不断升高。据研究资料显示,产酶菌株不仅对青霉
    素类、头孢菌素类药物表现出耐药性,而且对多种抗菌药都表现出较高的交叉耐药性和多重耐药性。在兽医临床实践中,对分离的鸡致病性大肠杆菌的耐药情况进行及时有效的监测,不仅有利于选择合适的药物有效防治疾病,而且有助于防止耐药菌在不同菌株问散播。本试验旨在通过ESBLs检测及药物敏感性试验,及时掌握西藏地区藏鸡大肠杆菌产ESBLs情况和耐药现状,为兽医临床合理选择抗菌药物、防止耐药菌株的传播提供理论依据。

        据2008年美国临床实验室标准化协会(CLSI,2oo8b)颁布的标准,进行初步筛选和表型确证试验。首先,将新增菌培养的受试菌株均匀涂布于MH琼脂平板后,用无菌镊子将各种抗菌药物CRO、CAZ、CTX及AZT药敏纸片,分别贴【paperpass】于培养基表面,各纸片距离药相等。30 min后,将贴好纸片的平皿倒置于37℃恒温箱,培养16h后,测量各药敏纸片的抑菌圈直径,以mm计算。如任一药物对受试菌的抑菌环直径满足以下条件即为疑似产ESBLs菌株:头孢曲松 (CRO)≤25 mm,头孢他啶(CAZ)≤22 mm,头孢噻肟(CTX)≤27 mm,氨曲南(AZT)≤27 mm。接着,将疑似产酶菌株做确认试验,新培养受试菌用无菌棉签涂布于MH平板,分别两两对应贴上头孢他啶CAZ(30“g/片)、头孢他啶/棒酸(CAz/cA,30/10g/片)和头孢噻肟CTX(30/*g/片)、头孢噻肟/棒酸(CTX/cA,30/10 ug/片)纸片,37℃过夜培养后,当两组药物中有任意一组中有加CA的抑菌圈直径比不加CA的抑菌圈直径相差≥5 mm,即确定为产ESBLs菌株。 

         药物敏感性试验。根据2008年CLSI(CLSI,2008a)颁布的标准_8],采用微量肉汤稀释
    法,向V型板上第一孑L自上而下依次加入各种药物15 L,吸取1 L菌液于平皿中用蒸馏水按1:1000稀释,用微量移液器吸取平皿中稀释好的菌液135 L加入第一孔中,第一孔混合均匀后吸出75L加入第二孑L中,用同法依次二倍稀释至第12孔,弃去75“L,则各管的浓度依次为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125和0.00625 ug/mL,置于37℃培养16 h,以无细菌生长孔内所含抗菌药物的最低浓度为最低抑菌浓度(MIC)。每个样品做3个重复,求其平均值。

        8种抗菌药物对4株鸡大肠杆菌的MIC值测定结果见表1。由表1结果可见,产酶菌L1对青霉 素类药物、氟喹诺酮类药物、氨基糖苷类药物等多种药物耐药,仅对头孢噻呋敏感,其敏感性低于其它非产酶菌株,这说明产酶菌对抗菌药物的耐药性非常严重。菌株L2仅对阿【万方】米卡星、头孢噻呋敏感,这可能是菌株1.2来自拉萨某鸡场长期使用抗菌药物造成的结果。产酶菌株L1和非产酶菌株L2对大多数抗菌药物的敏感性相似。菌株Z1和S2相对L2来说.其敏感性较高。以上结果显示,产酶菌L1对大多种类的药物的敏感性也要比不产酶菌敏感性低,说明产酶菌对这些药物的作用有一定影响,说明产酶菌株不仅对8一内酰胺类药物有耐药性,而且对其他抗菌药物,如氨基糖苷类、氟喹诺酮类、头孢菌素类等存在多重耐药性。